Odstranite metode zaščitne skupine Cys stranske verige tBu
Cys(tBu) Običajno v TFA in I2 sta razmeroma stabilna, zato ju pogosto uporabljamo za združevanje za proizvodnjo peptidov s tretjim parom disulfidnih vezi in več, ne da bi pri tem motili prejšnje pare disulfidnih vezi.
Odstranite tBu Metode običajno vključujejo metodo živosrebrovega acetata in triklorometilsilana/difenil sulfoksida.
Sledi uvod v korake metode z živosrebrovim acetatom:
- Prinesel bo tBu peptidov, raztopljenih v sredini ledu TFA (5-10 mg/ml)
- Dodajte 10-kratni ekvivalent živosrebrovega acetata in mešajte 3 ure.
- Rotirajte pod znižanim tlakom, da izhlapi odvečna TFA, raztopite v 10 % vodni raztopini ocetne kisline
- Dodajte 20-kratni ekvivalent merkaptoetanola in pustite stati 5 ur
- Centrifugirajte, da odstranite oborino in nato razsolite ali očistite s HPLC.